适用专业：生物科学、生物技术、园林、种子科学与工程、设施农业科学与工程

总学时：30学时；学分：2学分

一、说明

1．本课程的目的、任务。通过本实验课的学习使学生了解生物大分子的分离纯化方法，蛋白质、核酸及主要代谢产物的定性、定量分析技术，学习酶活性测定的方法和技术。培养学生严谨的科学态度，培养学生分析问题和解决问题的能力，并通过实验加深学生对生物化学基本理论的理解与掌握。

2．本课程的教学要求。通过本实验课的学习，加深生物化学基本理论的理解，较熟练地掌握比色、层析、电泳、离心等基本实验技术的原理和操作，提高观察、分析和解决问题的能力，培养学生实事求是的科学态度和扎实、严谨的工作作风，为学习后续课程和将来的实际工作及科学研究打好基础。

二、课程内容及课时分配

实验一  常用生化实验技术原理与应用（3学时）

通过实验理论的讲解与演示，掌握常用生化实验技术的原理与基本操作，主要有离心技术、电泳技术、层析技术、分光光度技术等。

实验二 植物组织中总糖和还原糖含量的测定（3学时）

本实验要求掌握总糖和还原糖含量的测定方法。

实验三  血糖定量测定（3学时）

本实验要求掌握微量滴定法的操作，掌握血糖测定的原理方法及意义，熟悉胰岛素对血糖的影响，了解其它测定血糖的方法。

实验四  纸层析法分离鉴定氨基酸（3学时）

通过用纸层析法分离氨基酸，掌握分配层析的基本原理及微量点样的基本操作，熟悉R_f值及其影响因素，学会一种鉴定氨基酸的简单方法。

实验五  蛋白质及氨基酸的颜色反应、变性及沉淀（3学时）

本实验要求掌握构成蛋白质的基本结构单位和蛋白质氨基酸的呈色反应原理，学会几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法，了解影响呈色反应的干扰因素。了解蛋白质沉淀与变性的关系，知道几种蛋白质沉淀方法的实际意义，加深对蛋白质胶体性质的认识。

实验六   血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳（3学时）

本实验要求掌握醋酸纤维薄膜电泳的基本原理和操作方法，学会常用电泳仪的使用方法，了解用醋酸纤维薄膜作为电泳支持物的优点及应用范围。

实验七  双缩脲法测量蛋白质含量（3学时）

本实验要求掌握双缩脲法测量蛋白质含量的原理和方法，掌握分光光度计的使用，学会标准曲线的制作方法。

实验八  动物肝脏中DNA的提取及鉴定（6学时）

本实验要求掌握浓盐法提取、鉴定DNA的基本原理和操作方法。

实验九  酵母RNA的分离提取及鉴定（6学时）

本实验要求掌握稀碱裂解法提取、鉴定RNA的基本原理和操作方法。

实验十   影响酶活力的因素（3学时）

本实验要求掌握激活剂和抑制剂、温度、pH值对酶活性影响，加深对酶性质的认识，学会进行简单的实验设计。

实验十一   小麦萌发前后淀粉酶活力测定（3学时）

本实验要求掌握分光光度计的原理，学会使用分光光度计的方法，掌握测定淀粉水解产物的方法，了解小麦种子萌发前后淀粉酶活力的变化，小麦萌发的时间及条件。

实验十二   血液中谷丙转氨酶活性测定（3学时）

本实验要求掌握测定谷丙转氨酶的原理及操作方法，了解谷丙转氨酶在代谢过程中的重要作用及其在临床诊断中的意义。对其它测定方法及规定单位要初步了解。

实验十三  维生素C的定量测定（3学时）

本实验要求掌握利用微量滴定法或比色法测定植物组织中维生素C的含量。在熟悉原理的基础上，掌握微量滴定管或分光光度计的使用。

三、推荐教材及参考书目

1.《生物化学实验》第三版 陈钧辉　科学出版社 2002　

2．《生物化学实验指导》   余冰宾  清华大学出版社 2004

3．《生物化学实验》       李如亮  武汉大学出版社 1998.1

4．《生物化学实验》       童耕雷  上海交通大学出版社 2005 

5．《生物化学实验技术教程》  赵亚华 华南理工大学出版社 2000

各实验内容及参考学时

实验序号	实 验 内  容		参考学时
一		常用生化实验技术原理与应用	3
二		植物组织中总糖和还原糖含量的测定	3
三		血糖定量测定	3
四		纸层析法分离鉴定氨基酸	3
五		蛋白质及氨基酸的颜色反应、变性及沉淀	3
六		血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳	3
七		双缩脲法测量蛋白质含量	3
八		动物肝脏中DNA的提取及鉴定	6
九		酵母RNA的分离提取及鉴定	6
十		影响酶活力的因素	3
十一		小麦萌发前后淀粉酶活力测定	3
十二		血液中谷丙转氨酶活性测定	3
十三		维生素C的定量测定	3
合计			45

备注：以上实验根据实际情况任选30学时。